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衛(wèi)生資格《檢驗技士》預(yù)習(xí)資料:免疫濁度法

時間:2023-03-20 03:12:34 衛(wèi)生資格 我要投稿
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  誤差和不確定度

衛(wèi)生資格《檢驗技士》預(yù)習(xí)資料:免疫濁度法

  區(qū)分誤差和不確定度很重要,因為誤差定義為:被測量的單位結(jié)果和真值之差。

  由于真值往往不知道,故誤差是一個理想的概念,不可能被確切地知道。

  但不確定度是可以一個區(qū)間的形式表示,如果是為一個分析過程和所規(guī)定樣品類型做評估時,可適用于其所描述的所有測量值。

  因此,測量誤差與測量不確定度無論從定義、評定方法、合成方法、表達(dá)形式、分量的分類等方面均有區(qū)別。

  免疫濁度法原理

  當(dāng)可溶性抗原與相應(yīng)抗體在兩者比例合適時,抗原抗體在特殊緩沖液中快速形成抗原抗體復(fù)合物,使反應(yīng)液出現(xiàn)濁度,如形成的復(fù)合物增加,反應(yīng)液的濁度隨之增加,與一系列的標(biāo)準(zhǔn)品對照,即可計算出受檢物的含量。

  按照儀器設(shè)計的不同分為透射比濁儀測定法和散射比濁儀測定法。測定方法又可分為速率法和終點法。

  凝膠內(nèi)沉淀試驗

  凝膠內(nèi)沉淀試驗是利用可溶性抗原和相應(yīng)抗體在凝膠內(nèi)擴散,形成濃度梯度,在抗原與抗體濃度比例恰當(dāng)?shù)奈恢眯纬扇庋劭梢姷某恋砭或沉淀環(huán)。

  凝膠支持物的種類:凝膠支持物的種類有瓊脂、瓊脂糖、葡聚糖或聚丙酰胺凝膠等。不同分子量的物質(zhì)在凝膠中擴散速度不同,藉此可用以識別不同待測物分子量的差別。

  免疫電泳技術(shù)原理

  免疫電泳技術(shù)實質(zhì)上是在直流電場作用下的凝膠擴散試驗。它的原理是將凝膠擴散置于直流電場中,在一定的條件下,抗原及抗體離解成為帶正電或負(fù)電的電子,在電場中向異相電荷的電極移動,所帶凈電荷量越多、顆粒越小,泳動速度越快,反之則慢。由于電流加速了抗原、抗體的運行速度,縮短了兩者結(jié)合的時間,加快了沉淀現(xiàn)象的產(chǎn)生。當(dāng)有多種帶電荷的物質(zhì)電泳時,由于靜電荷不同,而區(qū)分成不同區(qū)帶,使抗原決定簇不同的成分得以區(qū)分。

  影響因素有:①電場強度;②溶液pH;③離子強度;④電滲等。

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