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生殖道標(biāo)本的微生物檢驗
生殖道標(biāo)本的檢驗是臨床檢驗的重要組成部分,近年來由于性傳播疾病呈上升趨勢,加之抗生素不合理使用,生殖道疾病逐年增加,如何對標(biāo)本采集時間不當(dāng),標(biāo)本不及時送檢、標(biāo)本不合格、采集不規(guī)范等因素進行指導(dǎo)和控制是保證檢驗結(jié)果準(zhǔn)確性的重要手段,應(yīng)當(dāng)引起臨床醫(yī)生和檢驗工作者的重視。下面是yjbys小編為大家?guī)淼年P(guān)于生殖道標(biāo)本的微生物檢驗的知識,歡迎閱讀。
1 送檢指征
1.1 全身癥狀 生殖系統(tǒng)感染多不伴發(fā)熱,但在感染活動期或發(fā)生播散性感染時可發(fā)熱,但往往發(fā)熱與乏力同時存在,此外某些感染梅毒等累及神經(jīng)時雖不發(fā)熱,但也會出現(xiàn)全身乏力,急性期或慢性消耗感染者,可能累及胃腸道出現(xiàn)厭食等。
1.2 皮膚黏膜損害 斑疹、丘疹、 結(jié)節(jié)、水皰、囊腫、 糜爛、潰瘍等的出現(xiàn),或由損害發(fā)展而來有萎縮、癍痕患者出現(xiàn)疼痛、瘙癢癥狀。
1.3 男性泌尿生殖系統(tǒng)表現(xiàn) 尿痛、尿頻、尿急、尿道分泌物增多,會陰部疼痛及陰囊疼痛、性功能障礙,甚至泌尿生殖器畸形和缺損。
1.4 女性生殖系統(tǒng)表現(xiàn) 陰道分泌物增多及性狀異常、陰道瘙癢及膿性分泌物流出、下腹疼痛、月經(jīng)失調(diào)、外陰瘙癢、疼痛或性功能障礙。
2 采集標(biāo)本
女性尿道應(yīng)排尿1h后采集,先拭去尿道口的滲出物,再用拭子通過陰道靠著恥骨聯(lián)合按摩尿道采集分泌物,或者清洗尿道,用滅菌紗布或棉球擦拭,用泌尿生殖拭子插入尿道2~4cm旋轉(zhuǎn)拭子2s,男性尿道用生殖道拭子插入尿道腔2~4cm,旋轉(zhuǎn)拭子至少停留20s,使之容易吸收。
陰道分泌物應(yīng)先擦除過多分泌物和排出液,用無菌棉拭子采取陰道口內(nèi)側(cè)壁或后穹隆處分泌物,如果需要涂片再用一個拭子。
宮頸分泌物先用無潤滑劑的擴陰器使宮頸可見。用拭子擦去黏液和分泌物丟掉,用新的滅菌拭子插入宮頸管2cm采取分泌物,轉(zhuǎn)動并停留10~20s,讓拭子吸附分泌物置無菌管內(nèi)送檢。
男性前列腺應(yīng)清洗尿道口,沖洗尿道膀胱,按摩前列腺,用無菌容器收集送檢。
3 注意事項
生殖器是開放性器官,標(biāo)本采集過程中應(yīng)嚴(yán)格遵循無菌操作以減少雜菌污染,以免造成檢驗結(jié)果不真實性,導(dǎo)致臨床診斷出現(xiàn)偏差。
陰道內(nèi)有大量正常菌群存在,采取宮頸標(biāo)本應(yīng)避免觸及陰道壁。
沙眼衣原體在宿主細胞內(nèi)繁殖,取材時拭子應(yīng)在病變部位停留十幾秒,盡可能采集上皮細胞。
疑有厭氧菌感染,應(yīng)在床邊采樣,直接做厭氧培養(yǎng),避免標(biāo)本與氧氣接觸。
4 檢驗方法和報告方式
4.1 直接檢查 將合格標(biāo)本直接涂于清潔玻片上,用滅菌生理鹽水混勻,加蓋玻片鏡檢,可初步報告清潔度、線索細胞、細胞數(shù)量、 形態(tài)及運動性,若發(fā)現(xiàn)大量的發(fā)亮的芽生孢子及假菌絲,提示念珠菌感染,可用暗視野顯微鏡觀察螺旋體。
4.2 革蘭染色鏡查 觀察形態(tài)及染色性,炎癥細胞數(shù)量及線索細胞,有無念珠菌、假菌絲及孢子等。
4.3 報告方式 若在白細胞或上皮細胞內(nèi)見到革蘭陰性球菌成對排列可報告“找到革蘭陰性雙球菌”;若找到假菌絲和孢子可初步診斷為念珠菌感染。
5 分離、培養(yǎng)
直接接種血平板和中國蘭平板,并且同時進行增菌培養(yǎng)。若為革蘭陰性桿菌按氧化酶陽性或陰性及葡萄糖的利用實驗鑒定到種。若為革蘭陽性菌則按相關(guān)操作程序進行鑒定。
淋病奈瑟菌培養(yǎng)是淋病診斷的重要佐證,目前國外推薦的選擇培養(yǎng)基有TM和NYC,這些培養(yǎng)基均含有抗生素,可選擇抑制許多其他細菌,經(jīng)過一定條件培養(yǎng),根據(jù)菌落形態(tài)、革蘭染色、氧化酶試驗、葡萄糖發(fā)酵等鑒定,男性患者陽性率為80%~95%。女性患者陽性率為80%~90%。
superoxol試驗與觸酶實驗類似,但是用30%過氧化氫溶液進行,此實驗可區(qū)分淋病奈瑟菌和其他奈瑟菌相關(guān)菌種。
沙眼衣原體用特異性抗體檢測抗原的血清方法。
支原體用衣原體檢測試劑盒。
6 藥敏實驗及注意事項
采用紙片擴散法進行藥敏實驗,藥敏紙片及M-H瓊脂均購自北京天壇藥物生物技術(shù)開發(fā)公司。
每批培養(yǎng)基制備應(yīng)檢查M-H瓊脂的pH值,pH過低、過高都能使某些藥物失去效力,而使另一些藥物活性增高。
藥敏紙片應(yīng)冷凍保存,在使用前1~2h移出冰箱,平衡至室溫后才能打開,防止熱空氣接觸冷紙片時產(chǎn)生冷疑水,降低含量。
7 討論
生殖道標(biāo)本的微生物檢驗的準(zhǔn)確性關(guān)鍵在于標(biāo)本的采集的真實性、可靠性。如果標(biāo)本采集不合格,再好的檢驗人員也無法得出正確的結(jié)論。
由于抗生素的大量使用,細菌對藥物的耐藥性不斷增強,這已成為生殖道抗感染治療的嚴(yán)重問題,作為者應(yīng)積極協(xié)調(diào),主動配合醫(yī)生,建議患者在使用抗生素前做微生物學(xué)檢查、培養(yǎng),得到真實的結(jié)論提高診斷率,合格用藥,減少病人精神痛苦和經(jīng)濟負擔(dān),更好地為臨床服務(wù)。
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