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凝血檢測(cè)的誤差來源
存在凝血紊亂的病人可能出血或可能栓塞。凝血涉及凝血因子和血小板的激活。評(píng)估血小板事件， 可通過包括CBC計(jì)數(shù)，外周血涂片的檢查，出血時(shí)間的檢查和血小板聚集測(cè)試。評(píng)估凝血因子 典型地靠PT和APTT來看，異常的PT或aPTT可通過使用糾正實(shí)驗(yàn)來確定由于因子缺乏還是抑制 物引起的。如果延長(zhǎng)的時(shí)間在糾正實(shí)驗(yàn)中得到糾正，則進(jìn)行因子檢測(cè)識(shí)別哪個(gè)因子缺乏。抑制物 則包括某些特定因子的抑制物和狼瘡抗凝物，所以未得到糾正的應(yīng)篩查一下。一般凝血檢查均采 用枸椽酸鈉抗凝管。下面是yjbys小編為大家?guī)淼年P(guān)于凝血檢測(cè)的誤差來源的知識(shí)，歡迎閱讀。
凝血檢測(cè)的誤差來源
1. PT和APTT檢測(cè)的誤差 一般因子僅是輕微減少，不會(huì)影響導(dǎo)致凝血時(shí)間延長(zhǎng)，只有比正常范圍減少20%-40%時(shí)，才可 能導(dǎo)致凝血時(shí)間延長(zhǎng)。光學(xué)法的PT和APTT可能受高脂血，黃疸血影響而時(shí)間縮短。未適當(dāng)離心 的血漿可能存在PF4，當(dāng)使用APTT監(jiān)測(cè)肝素時(shí)，PF4可與肝素結(jié)合，導(dǎo)致假性APTT縮短。同時(shí) FVIII是急性時(shí)相反應(yīng)蛋白，如果病人在急性炎癥期，可能FVIII急劇升高，導(dǎo)致APTT假性縮短。
2. 凝血酶時(shí)間TT檢測(cè)的誤差 凝血酶時(shí)間即測(cè)量纖維蛋白原轉(zhuǎn)化形成(交聯(lián))纖維蛋白的時(shí)間。纖維蛋白血癥，F(xiàn)DP 水平升高，和異常蛋白可干擾纖維蛋白的交聯(lián)從而導(dǎo)致假性TT延長(zhǎng)。淀粉樣變性可抑制 纖維蛋白原轉(zhuǎn)化成纖維蛋白，也可導(dǎo)致TT延長(zhǎng)。在一些嚴(yán)重疾病，如存在肝素類抗凝物 可導(dǎo)致TT延長(zhǎng)。
下面會(huì)詳細(xì)介紹實(shí)驗(yàn)室中凝血特定檢測(cè)的常見干擾因素。1. 抗凝比例不對(duì) 枸椽酸抗凝管血液與抗凝劑比例為9:1的比例。充盈不足或過度可導(dǎo)致凝血時(shí)間檢測(cè)的 異常。
當(dāng)HCT大于 55% 或小于21%時(shí)候，需要用以下公式修正: C= 0.00185 X(100 H)X VC 是3.2%枸椽酸鈉的量，以mL計(jì),H 是HCT的值
V 是血量，以mL計(jì)
2. 稀釋或抗凝劑的污染 從留置管或?qū)Ч苤惺占难獦颖究赡艽嬖跈z測(cè)干擾。樣本被沖洗管路或溶血可影響凝血檢測(cè) 結(jié)果。如必須要從內(nèi)置導(dǎo)管中收集血液，要避免從肝素化導(dǎo)管采集。 如果必須從肝素化的導(dǎo)管收集，采集前確保要足夠的沖洗。NCCLS 標(biāo)準(zhǔn)建議使用 5mL 生 理鹽水進(jìn)行沖洗。收集前需至少使用 5mL 或 6 倍的導(dǎo)管的死腔量排出丟棄。血管護(hù)理標(biāo)準(zhǔn) 和實(shí)踐指南關(guān)于死腔量的使用推薦遵從制造商的說明書。此指南同時(shí)描述了血液不應(yīng)從各種 不同類型的內(nèi)置導(dǎo)管收集，靜脈注射裝置，和內(nèi)置的心血管或臍帶中收集。即使新人死腔量 的的規(guī)定，樣本從肝素化的導(dǎo)管中采集容易被肝素污染。從而，最好從外周血中采集，避免 肝素，水蛭素，或阿加曲班注射治療用的手臂側(cè)采集。在凝血檢測(cè)前，肝素可被使用的聚凝 胺中和或去除;然而，殘留的肝素可能干擾到檢測(cè)。通過增強(qiáng)抗凝血酶活性，肝素抑制活化 的 FII，F(xiàn)X，F(xiàn)IX，F(xiàn)XI，F(xiàn)XII 和激肽 K。相比，重組水蛭素，達(dá)那肝素，和阿加曲班僅抑制 活化的 FII。這些抗凝劑(肝素，重組水蛭素，和阿加曲班)可導(dǎo)致 APTT 延長(zhǎng)，并干擾凝 血檢測(cè)如因子檢測(cè)和狼瘡抗凝物檢測(cè)。因子檢測(cè)可產(chǎn)生假性減低，而狼瘡抗凝物可產(chǎn)生假陽性。
3. 創(chuàng)傷性失血?jiǎng)?chuàng)傷性失血可導(dǎo)致人為的凝血檢測(cè) PT 和 APTT 的縮短。這是因?yàn)閮?nèi)皮細(xì)胞釋放組織因子后 過度的激活凝血因子和血小板。正確的采集技術(shù)可避免此操作的組織因子混入從而避免此人 為的干擾。
4. 類風(fēng)濕因子 RF纖溶過程是由纖溶酶介導(dǎo)，并降解纖維蛋白凝塊成為 D-二聚體和 FDP 的過程。纖溶同時(shí)也 降解完整的纖維蛋白原，產(chǎn)生 FDP。纖維蛋白降解產(chǎn)物和纖維蛋白原降解產(chǎn)物稱為 FDPs 或 FSPs.檢測(cè) D-二聚體和 FDP 使用的是半定量或定量的免疫法。 乳膠凝集法:病人血漿與包被了抗-FDP 抗體的乳膠顆�；旌稀Ｈ绻嬖� FDP，則會(huì)與乳膠 顆粒中的 FDP 抗體結(jié)合。結(jié)合后聚集物可被觀察到。不同稀釋度的病人血漿可以被半定量 方法測(cè)量則為 FDP 滴度。乳膠凝集檢測(cè)同樣可用于 D-二聚體，不僅是技術(shù)員的肉眼觀察， 也可以凝血分析儀上測(cè)量濁度。ELISA 方法:定量的 ELISA 檢測(cè)可用于 FDP 和 D-二聚體。傳統(tǒng) ELISA 檢測(cè)方法較精確， 但因?yàn)榉治鰰r(shí)間較長(zhǎng)不常用。現(xiàn)在也有自動(dòng)化的 ELISA 檢測(cè)(VIDAS, bioMérieux, Durham, NC).D-dimer and FDP 檢測(cè)一個(gè)重要的干擾是 RF 的干擾�？蓪�(dǎo)致假陽性結(jié)果。如果 PT, aPTT, TT, and fibrinogen 均正常，而 D-dimer and FDP 檢測(cè)升高很可能即出現(xiàn)此干擾。
5. 脂血，溶血或血小板減少樣本的血小板聚集檢測(cè) 血小板聚集測(cè)量血小板的相互粘附形成止血團(tuán)塊的能力，是一期止血的關(guān)鍵成分。可以用富 血小板血漿或全血進(jìn)行。膠原，瑞斯托霉素，花生四烯酸，二磷酸腺苷，腎上腺素，和凝血 酶可以刺激血小板因而誘導(dǎo)聚集。對(duì)激動(dòng)劑的響應(yīng)可提供對(duì)血小板功能紊亂的類型。測(cè)量聚 集的響應(yīng)一般是基于樣本的透光性改變而測(cè)量 血小板聚集可受一些因素的影響。脂血和溶血標(biāo)本可使聚集檢測(cè)困難，由于其使聚集的透光 改變減少。血小板減少也可使聚集評(píng)估很難，由于低血小板計(jì)數(shù)本身可產(chǎn)生異常聚集類型。
6. 抗凝物或狼瘡抗凝物檢測(cè)的干擾ISTH 狼瘡抗凝物分支委員會(huì)推薦用兩個(gè)敏感的針對(duì)狼瘡抗凝物的檢測(cè)以評(píng)估不同凝血途徑 的成分。這是基于凝血時(shí)間的 dRVVT，和基于 APTT 的白陶土凝血檢測(cè)，和稀釋凝血酶原 時(shí)間(組織因子通路抑制測(cè)試)。狼瘡抗凝物可使磷脂依賴的凝血檢測(cè)的時(shí)間延長(zhǎng)。因?yàn)槠?結(jié)合磷脂因此干擾磷酯在凝血瀑布學(xué)說中的作用。狼瘡抗凝物篩查通過 使用一個(gè)低濃度的 磷脂以增強(qiáng)敏感性，任何異常篩查實(shí)驗(yàn)結(jié)果(延長(zhǎng))一般需要 1:1 混合實(shí)驗(yàn)以顯示凝血時(shí) 間依然延長(zhǎng)。確認(rèn)實(shí)驗(yàn)一般是加入過量的磷脂，凝血時(shí)間則顯示縮短至正常趨勢(shì)。血小板中 和實(shí)驗(yàn)(PNP)是一個(gè)確認(rèn)檢測(cè)，冷凍-融解的血小板提供過量的磷脂。六邊相的磷脂中和 實(shí)驗(yàn)也同樣基于相同的原理—即，凝血時(shí)間可能不被糾正，在磷脂的六相期時(shí)。需要關(guān)注的 是 APTT 可能會(huì)或不會(huì)延長(zhǎng)，基于試用中磷脂的量多少。 在很多的抗凝物檢測(cè)中，肝素(包括皮下注射低劑量肝素)可以引起假陽性狼瘡抗凝物檢測(cè) 結(jié)果。肝素抑制活性 FII，X，IX，XI，XII 和激酶 K。因此，凝血時(shí)間如 PT 和 APTT 延長(zhǎng)， 同時(shí)可被狼瘡抗凝物干擾。重組水蛭素，達(dá)那肝素，阿加曲班抑制活化的 II 因子和同時(shí)使 凝血時(shí)間延長(zhǎng)。在凝血檢測(cè)開始前，可去除肝素或用聚凝胺中和;然而殘留的肝素可繼續(xù)造 成檢測(cè)的干擾。在香豆素類抗凝的樣本不影響狼瘡抗凝物檢測(cè)結(jié)果
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