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Dipasic對(duì)結(jié)核菌耐藥性的研究
【關(guān)鍵詞】:Dipasic 耐藥性
【論文】:抗結(jié)核藥物的使用,在結(jié)核病防治上起了劃時(shí)代的作用。50年代采用INH PAS聯(lián)合治療,取得了較好療效。但PAS服用量大,消化道反應(yīng)多,病人不能耐受,90%不能完成治療程。瑞士Geistlich藥廠研制的Dipasic(簡(jiǎn)稱DPC)(德國(guó)又名GEWO399),是以特殊方法,將INH與PAS合成的化合物。它能代替INH PAS聯(lián)合用藥,增加療效,副作用明顯比PAS為少,德國(guó)Freudenthal等50余位專家均有Dipasic臨床應(yīng)用的報(bào)告,認(rèn)為有效。但無(wú)Dipasic耐藥性的報(bào)道。當(dāng)前,我國(guó)耐藥性病人不斷增加,尋求合理用藥,是當(dāng)務(wù)之急,為此我們對(duì)Dipasic作耐性研究,目的在于,(1)了解Dipasic對(duì)耐藥菌株是否有效?(2)Dipasic的藥物抑菌濃度如何?以便研究用量與用法,提高臨床療效。1、研究方法:從安徽醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院的門診及病房肺結(jié)核病人的痰進(jìn)行結(jié)核菌培養(yǎng),無(wú)論病人是初治抑復(fù)治,亦不分男女老少,凡痰菌培養(yǎng)陽(yáng)性者,即作為研究對(duì)象。結(jié)核菌的檢驗(yàn),按標(biāo)準(zhǔn)常規(guī)操作進(jìn)行。藥敏培養(yǎng)基的制備:液體雞蛋培養(yǎng)基內(nèi),按比例加入抗結(jié)核藥物,其濃度按我國(guó)藥敏標(biāo)準(zhǔn),如INH、PAS、TB1,每毫升分別為1μg及10μg,SM、KM、CPM分別為10μg,RFP及RFD分別為50μg及250μg,EMB為5μg及50μg。Dipasic則暫定為每毫升含藥0.1μg、0.5μg、1.0μg及10μg四種。加入藥物后,充分搖勻混合后,分裝在中試管內(nèi),每管5毫升,擺成斜面,進(jìn)行85℃—90℃一小時(shí)凝固滅菌,24小時(shí)后再滅菌一次,制成的含藥培養(yǎng)基,保存在冰箱,一個(gè)月內(nèi)有效。菌液制備:取培養(yǎng)基上生長(zhǎng)一個(gè)月內(nèi)的菌落,于磨菌器內(nèi)滅菌生理鹽水研磨呈均勻的菌液,再加滅菌鹽水稀釋,與標(biāo)準(zhǔn)管比較(制成每毫升含1毫升的菌液),最后100倍稀釋成每毫升含10-2毫克菌液備用。菌液接種:將含不同濃度的含藥培養(yǎng)基順序排列,并有不含藥物的培養(yǎng)基作為對(duì)照。取每毫升含10-2毫克的菌液,每管接種0.1毫升,接種菌量為10-3毫克的菌液。放在37℃溫箱內(nèi)培養(yǎng),每周觀察一次,四周報(bào)告結(jié)果。報(bào)告的標(biāo)準(zhǔn)是,如培養(yǎng)基上無(wú)菌生長(zhǎng)者為(一),培養(yǎng)基上有菌落數(shù)在50個(gè)以下者為( ),培養(yǎng)基上菌落數(shù)50個(gè)以上,但無(wú)融合者為( ),培養(yǎng)基上菌落大部分融合者為( )。2、研究結(jié)果:我們研究的10種抗結(jié)核藥物耐藥性試驗(yàn),這10種抗結(jié)核藥物是:INH、PAS、DPC、TB1、EMB、RFP、RFD、SM、KM及CPM,圍繞本文目的,我們僅取30例病人的其中INH、PAS及DPC三種藥物的耐藥性進(jìn)行分析,其他另行報(bào)道。INH、PAS的濃度,按國(guó)家耐藥性標(biāo)準(zhǔn),分為1μg及10μg,以每毫升1μg為耐藥上界,1μg藥濃下不能生長(zhǎng)者為陰性,為敏感菌。1μg生長(zhǎng)者為陽(yáng)性,為耐藥菌。DPC的濃度,由于我們尚需尋求合適的抑菌濃度,故分為每毫升含藥0.1μg、0.5μg、1.0μg及10μg四種不同的濃度。為便于統(tǒng)計(jì)比較,暫以1μg作為耐藥標(biāo)準(zhǔn),1μg以下者為敏感,1μg以上者為耐藥。
表1 30例耐藥情況分析
培養(yǎng)結(jié)果 INH(%) PAS(%) DPC(%)
敏感 3(10.0) 22(73.3) 20(66.6)
耐藥 27(90.0) 8(26.7) 10(33.4)
從表1可見(jiàn)耐INH菌珠已達(dá)90%,耐DPC菌株為33.4%,經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,X2=27.44,P<0.001,有高度顯著性。PAS與DPC比較,經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,校正卡方為0.062,P>0.05,無(wú)顯著性。
表2 敏感與耐藥程度的分析
培養(yǎng)結(jié)果 INH PAS DPC
(一) 3(10.0%) 22(73.4%) 20(66.6%)
(+) 1(3.3%) 2(6.6%) 3(10.0%)
(++) 4(13.3%) 3(10.0%) 6(20.0%)
(+++) 22(73.4%) 3(10.0%) 1(3.3%)
表1和表2可以說(shuō)明INH、PAS、DPC為三種不同的抗結(jié)核藥物,他們對(duì)不同的結(jié)核菌,有不同的敏感與耐藥情況。從8例耐PAS菌株中,我們發(fā)現(xiàn),此8例同時(shí)有三種以抗結(jié)核藥物之耐藥,耐DPC菌株10例中,也有此一現(xiàn)象,是多種耐藥性菌株。
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