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龍膽藥材與常見(jiàn)偽品的數(shù)碼顯微鑒別
【摘要】 目的建立快速檢驗(yàn)龍膽藥材質(zhì)量的方法。方法在性狀鑒別的基礎(chǔ)上,采用顯微數(shù)碼成像技術(shù),對(duì)龍膽類商品藥材進(jìn)行了顯微鑒別。結(jié)果龍膽藥材與其偽品通過(guò)不同的顯微特征，可以一一區(qū)分。結(jié)論建立的方法簡(jiǎn)單、快捷、有效，可以控制龍膽藥材的質(zhì)量。
【關(guān)鍵詞】 龍膽； 數(shù)碼顯微鑒定； 偽品
Microscopic Identification of Radix Gentianae by Digital Imaging Technique
CAO Yue， ZUO Dai?ying， SUN Qi?shi, ZHA Mei?na, ZHAO Jing?yuan
1.Liaoning Provincial Institute of Food and Drug Control, Shenyang 110023,China；2. Shenyang Pharmacological University, Shenyang 110016,China; 3. Liaoning Provincial Hospital in Qinyuan, Qingyuan 113300, China
Abstract：ObjectiveTo establish a rapid method for Radix Gentiana scabra Bge. by digital imaging technique.MethodsBased on the morphological identifiion, we further studied the microscopic structures of the collected samples by digital imaging technique.ResultsRadix Gentiana scabra Bge. and its counterfeit goods were identificated respectively.ConclusionThe method is simple, fast, effective and can control the quality of medicines Gentiana.
Key words： Radix Gentiane scabre； Digital microscopic identification； Counterfeit goods
龍膽為龍膽科植物條葉龍膽Gentiana manshurica Kitag．，龍膽Gentiana scabra Bge．，三花龍膽Gentiana triflora Pall．或堅(jiān)龍膽Gentiana rigescens Franch．的干燥根及根莖［1］。前三者習(xí)稱“龍膽”，后一種習(xí)稱“堅(jiān)龍膽”，具有清熱燥濕、瀉肝膽實(shí)火的作用。近年來(lái)龍膽的商品藥材中時(shí)常摻偽，為了控制龍膽及其制劑的質(zhì)量，本文收集了龍膽及常見(jiàn)的偽品，在性狀鑒別的基礎(chǔ)上，采用數(shù)碼成像技術(shù)進(jìn)行了顯微鑒定。
1 器材與方法
CAMAG RepROSTAR3數(shù)碼成像系統(tǒng)，OLYMPUS CX41-32C02顯微鏡，OLYMPUS BX51顯微鏡。
龍膽藥材，為遼寧天瑞綠色產(chǎn)業(yè)科技開(kāi)發(fā)有限公司GAP生產(chǎn)基地的栽培品種；三花龍膽采自吉林長(zhǎng)白山；堅(jiān)龍膽、小秦艽Gentiana dahurica Fisch.購(gòu)買于安國(guó)市場(chǎng)；草本威靈仙Veronicastrum sibirecum (L.)Pennell.采自遼寧省桓仁縣和本溪市；桃兒七Podophyllum emodi Wall.樣品由沈陽(yáng)藥科大學(xué)中藥學(xué)院孫啟時(shí)教授提供，以上品種均由其鑒定。見(jiàn)表1。
取藥材樣品，粉碎，置于載玻片上，分別加水或水合氯醛透化后制成表面片。結(jié)合性狀，將制備好的切片置顯微鏡下觀察,根據(jù)《中國(guó)藥典》和相關(guān)研究專論［2］進(jìn)行鑒定,數(shù)碼相機(jī)拍攝,用成像工作站結(jié)合其它的圖像軟件對(duì)圖像進(jìn)行裁剪、拼接等處理。
2 結(jié)果
2.1 顯微鑒別
2.1.1 龍膽Gentiana scabra Bge．外皮層碎片細(xì)胞長(zhǎng)大，完整者表面觀呈類紡錘形，長(zhǎng)100～457 μm,直徑35～103 μm；內(nèi)皮層碎片細(xì)胞巨大，完整者表面觀呈類方形、長(zhǎng)方形或扁方形，長(zhǎng)（縱向）68～498 μm導(dǎo)管主為梯紋及網(wǎng)紋導(dǎo)管，直徑15～51 μm，另有少數(shù)螺紋導(dǎo)管（根莖），直徑約12 μm；草酸鈣針晶較多，不規(guī)則散在于薄壁細(xì)胞中或充塞于細(xì)胞一角。極纖細(xì)，有的呈細(xì)棱狀、棒狀或小顆粒狀，長(zhǎng)約至10 μm，根莖薄壁細(xì)胞中的針晶常密集成堆或條狀。見(jiàn)圖1。職稱論文
2.1.2 三花龍膽Gentiana triflora Pall．草酸鈣針晶較多，不規(guī)則充塞于薄壁細(xì)胞中。大多極纖細(xì)，有的呈細(xì)棱形或短小似細(xì)顆粒，長(zhǎng)1～9 μm；根莖薄壁細(xì)胞中的針晶常密集成堆或條狀，有的便于細(xì)胞一端；石細(xì)胞較多。呈類圓形、類多角形，有的一邊尖突，長(zhǎng)42～99 μm，直徑29～45 μm，壁厚薄不勻，7～16 μm紋孔類圓形或裂縫狀，孔溝較粗或先端擴(kuò)大，有的胞腔內(nèi)含細(xì)小針晶；內(nèi)皮層碎片細(xì)胞巨大，完整者表面觀呈扁方形、類長(zhǎng)方形或類方形，長(zhǎng)141～457 μm，直徑49～556 μm，端壁平直，側(cè)壁細(xì)波狀彎曲，平周壁現(xiàn)纖細(xì)的橫向線狀紋理；外皮層碎片細(xì)胞長(zhǎng)大，完整者表面觀呈長(zhǎng)紡錘形、類橢圓形、類長(zhǎng)方形，長(zhǎng)85～360（～498） μm，直徑34～94 μm，壁稍彎曲或細(xì)波狀，每個(gè)細(xì)胞有1～13（～16）橫隔壁，將細(xì)胞分隔成2～14（～17）個(gè)小細(xì)胞，橫隔壁常連珠狀增厚。見(jiàn)圖2。表1 樣品來(lái)源（略）
2.1.3 堅(jiān)龍膽Gentiana rigescens Franch．草酸鈣方晶較多，散在于薄壁細(xì)胞中。呈類方形或片狀，細(xì)小，直徑4～11 μm；內(nèi)皮碎片細(xì)胞巨大，完整者表面觀呈類方形或類長(zhǎng)方形，長(zhǎng)124～320 μm，直徑81～200 μm，端壁稍彎曲，側(cè)壁較平直或稍彎曲，平周壁現(xiàn)較粗而密的橫向線狀紋理，粗至3 μm，每個(gè)大細(xì)胞有4～14縱隔壁，將細(xì)胞分隔成5～15個(gè)柵狀小細(xì)胞，縱隔壁稍增厚，或呈連珠狀；草酸鈣針晶眾多，不規(guī)則充塞于薄壁細(xì)胞中。纖細(xì)，有的呈棱狀或細(xì)桿狀，長(zhǎng)4～9（～18） μm，粗3 μm，也有針晶密集成堆；導(dǎo)管主為具緣紋孔導(dǎo)管，直徑8～30 μm；纖維主為纖維管胞，呈長(zhǎng)棱形，直徑11～33 μm，壁厚3～6 μm，具緣紋孔明顯，紋孔口短縫狀或十字狀，稍超出紋孔緣。見(jiàn)圖3。
2.1.4 小秦艽Gentiana dahurica Fisch.草酸鈣針晶較少，散在或存在于薄壁細(xì)胞中。微小，針狀或桿狀，長(zhǎng)約至10 μm。也有結(jié)晶呈微細(xì)粒狀；內(nèi)皮層細(xì)胞（根須）偶見(jiàn)，多單個(gè)散在，淡黃綠色或幾個(gè)無(wú)色。呈長(zhǎng)條形，兩端平截或稍傾斜，直徑11～25 μm，長(zhǎng)約至315 μm，壁邊增厚一邊薄，厚約至11 μm，孔溝外口呈龐狀突起，表面觀呈細(xì)小雙圈狀；栓化細(xì)胞成片，常與厚壁網(wǎng)紋細(xì)胞上下連接淡黃色或近無(wú)色。表面觀呈類棱形或長(zhǎng)方形，直徑20～63 μm，長(zhǎng)至180 μm；厚壁網(wǎng)紋細(xì)胞較多，數(shù)個(gè)毗連或單個(gè)散在，常與栓化細(xì)胞上下連接，淡黃色、淡綠色或淡棕色。呈類棱形、類紡錘形、類三角形、類長(zhǎng)方形或類圓形，有的一端斜尖，直徑20～66 μm，長(zhǎng)64～216 μm，壁螺狀或網(wǎng)狀增厚，木化，有的螺狀增厚壁斜向交錯(cuò)扭結(jié)，網(wǎng)孔形狀、大小不一，有的呈縱或斜裂縫狀、不規(guī)則類長(zhǎng)圓形、細(xì)小橢圓形，或紋孔偶見(jiàn)；導(dǎo)管主為網(wǎng)紋、螺紋導(dǎo)管，偶有網(wǎng)狀具緣紋孔導(dǎo)管，直徑9～55 μm，有的導(dǎo)管分子較短，長(zhǎng)約104 μm。見(jiàn)圖4。
2.1.5 草本威靈仙Veronicastrum sibirecum (L.)Pennell.淀粉粒較多；中柱鞘纖維多成束,有時(shí)伴有石細(xì)胞； 石細(xì)胞散在或成群,類方形、短紡錘形或不規(guī)則形,壁孔明顯。見(jiàn)圖5。
2.1.6 桃兒七Podophyllum emodi Wall.根橫切面：表皮細(xì)胞1列，外側(cè)壁具馬蹄形增厚的角質(zhì)層。下皮細(xì)胞1列；皮層寬，約占橫切面的3/4；內(nèi)皮層凱氏點(diǎn)可見(jiàn)；初生木質(zhì)部4～5原型，無(wú)髓。見(jiàn)圖6。
2.2 性狀鑒別及顯微鑒別檢索見(jiàn)表2～3。表2 性狀鑒別檢索表
1.根表面具有橫皺紋（略）表3 顯微鑒別檢索表（略）
3 討論
本文收集了藥用龍膽及其偽品，并從性狀、顯微等常規(guī)經(jīng)驗(yàn)鑒別手段入手，解決了龍膽與常見(jiàn)偽品的鑒別方法，通過(guò)表2、表3，可以將龍膽與偽品一一加以區(qū)分。建立的方法簡(jiǎn)單、快捷、有效，可以控制藥材的質(zhì)量。顯微鑒別中使用偏光顯微鏡，可以使草酸鈣晶體、淀粉粒等清晰可見(jiàn)，有效縮短檢驗(yàn)時(shí)間，提高效率。
【參考文獻(xiàn)】
［1］國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典，Ⅰ部［S］.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005：64.
［2］徐國(guó)鈞.中藥材粉末顯微鑒定［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，2009：58.
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