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野生葛根與栽培葛根藥材性狀顯微組織差異比較研究
【摘要】 目的中藥葛根栽培品與野生品藥材性狀顯微組織差異比較。方法藥材性狀比對，根橫切面、粉末顯微特征測量和比對。結(jié)果葛根野生品與栽培品藥材性狀區(qū)別：野生葛根呈長圓柱形，直徑1～6 cm，切面呈棕褐色，纖維性；栽培葛根呈長紡錘形，直徑2～12 cm，顯粉性。顯微組織方面區(qū)別表現(xiàn)在：葛根野生品根橫切面晶鞘纖維束眾多，有多層切向排列的分泌道群，木質(zhì)部導管粗大，排列密集，淀粉粒較少；栽培品晶鞘纖維束、分泌道群均較少，木質(zhì)部導管排列稀疏，徑向排列，淀粉粒眾多。結(jié)論葛根栽培品與野生品在藥材性狀和顯微組織上存在一定差異，外觀性狀的差異和根橫切面晶鞘纖維束、導管和淀粉粒的多少和大小，可以做為兩者的鑒別特征。
【關(guān)鍵詞】 葛根； 栽培品； 野生品； 藥材性狀； 顯微特征； 差異
Study on the Difference in Shapes, Properties and the Microscopic Frameworks of Wild and Cultivated Radix Puerariae
GE Xiao?guang, FENG Xue?feng, FU Gui?fang, LI Xiao?ming, WU Zhi?gang, SHAO Ai?juan, YANG Jing?yu, LIU Si?si
(Institute of Chinese Materia Medica , China Academy of Chinese Medical Sciences, Beijing 100700, China)
Abstract：ObjectiveTo indicate the difference shapes, properties and the microscopic frameworks of wild and cultivated Radix Puerariae. MethodsComparing the shapes and properties , measuring and comparing the microscopic characters of transverse section and the powder and disintegrated tissue of roots. ResultsFor the shapes and properties, wild Radix Puerariae has long-column shape with the diameter of 1～6 cm and deep brown fibre section. Cultivated Radix Puerariae has long-spindle shape with diameter of 2～12 cm and light brown powder section. For the microscopic frameworks, the root transverse section of wild Radix Pueraria has much crystal fiber bundle with multilayer,the vessel of xylem is crassitude with dense ranks and a few starch grain, the root transverse section of the cultivated has a few crystal fiber bundle and a few groups of secretory tube, the vessel of xylem has radial ranks with much starch grain. ConclusionWild Radix Puerariae and cultivated Radix Puerariae have differences shapes and properties and the differences of microscopic frameworks. The main characteristics of them are the different shapes and properties and the different size of xylem vessel and different number of groups of secretory tube and starch grain.
Key words：Pueraria lobata (Willd.)Ohwi; Wild Radix Pueraria; Cultivated Radix Pueraria; Shapes and properties; Microscopic; Difference
中藥葛根為豆科植物野葛Pueraria lobata (Willd.)Ohwi的根,具有解肌退熱、生津、透疹、升陽止瀉等功效［1］。野葛在我國大部分地區(qū)有分布，藥材主要產(chǎn)于河南、安徽、湖南、湖北、浙江、陜西、四川、重慶等省市。野葛傳統(tǒng)應(yīng)用野生品為主，但隨著葛根產(chǎn)品的開發(fā)應(yīng)用，野生資源不足與采挖困難問題顯現(xiàn)。近年來在安徽、江西、湖北等地有野葛栽培，安徽霍山野葛栽培品能少量投入市場。以往有關(guān)葛根生藥學研究多是針對野生藥材及其地方品種或粉葛的［2～4］�！吨袊幍洹犯鸶幉臉藴适轻槍σ吧返�，沒有葛根栽培品藥材標準。本文在對葛根藥材資源和市場調(diào)查的基礎(chǔ)上，采集和購買了大量葛根藥材商品和實驗樣品，對野葛野生品與栽培品的藥材性狀、顯微組織方面差異進行比較研究，以期為葛根野生品與栽培品的鑒別、制定葛根栽培品的藥材標準提供科學的依據(jù)。
1 材料
實驗樣品采自5省區(qū)，實地采集和購買藥材樣品共19份（野生14份，栽培5份），栽培樣品中收集了1年生、2年生和3年生樣品，用于實驗對照。所有樣品經(jīng)馮學鋒鑒定均為豆科植物野葛Pueraria lobata (Willd.)Ohwi的根,憑證標本存中國中醫(yī)科學院中藥研究所標本館（CMMI）。見表1。
2 方法
首先對實地采集樣品（不同生長年限的和野生的）進行外觀形狀和顯微鏡觀察，尋找鑒別特征和差異點，再觀察大量市場藥材樣品，分析考察各性狀顯微特征的穩(wěn)定性。通過觀察和測量葛根藥材的大小、顏色、形狀等性狀特征，對其栽培品與野生品性狀特征進行比對。通過光學顯微鏡觀察根橫切片，粉末和解離組織制片，對葛根栽培品與野生品顯微組織進行比對、顯微特征測量和顯微照相。
2.1 根橫切片制備選取距葛根的根部，軟化后，采用常規(guī)石蠟切片或徒手切片法制片。
2.2 樣品解離組織制片采用藥典的氫氧化鉀法，將樣品切成寬或厚約2mm的小條或片，置于試管中，加5％氫氧化鉀溶液適量，加熱至用玻璃棒擠壓能離散為止，傾去堿液，加水洗滌后，取出少量置載玻片上，用解剖針撕開，以稀甘油裝片。
2.3 樣品粉末制片將樣品粉碎，過80目篩，粉末用冰醋酸-甘油-水（1∶1∶1）封片。
2.4 顯微特征測量葛根野生品和栽培品各產(chǎn)地樣品，每產(chǎn)地樣品取2～3植株，做解離組織或粉末制片，測量比對淀粉粒、晶纖維、草酸鈣方晶和導管的直徑等參數(shù)，每特征測量20個數(shù)據(jù)，計算最大值、最小值和平均數(shù)。
光學顯微鏡型號OLYMPUS-BHT，顯微數(shù)碼攝影儀型號Anymicro DSS YT-5M，Anymicro DSS圖像分析系統(tǒng)。
3 結(jié)果
3.1 藥材性狀特征
3.1.1 野生葛根藥材個子呈長圓柱形，直徑(0.5)1～6 cm。表面灰棕色，有縱皺紋。橫切面棕褐色，纖維性，可見棕色同心性環(huán)紋。質(zhì)韌，纖維性。見圖1A1。
葛根片呈縱切的長方形厚片或橫切片，長2～3 cm,厚0.5～1 cm。外皮灰棕色，有縱皺紋。切面淡棕色，縱切面有由纖維形成的縱條紋，粗糙；橫切面可見棕色同心性環(huán)紋。質(zhì)韌，纖維性強。無臭，味微甜。見圖1B3。
3.1.2 栽培葛根藥材個子呈長紡錘形或長圓柱形，直徑2～12cm，表面黃棕色，見長橫向皮孔。橫切面黃白色，可見淡棕色同心性環(huán)紋。體重，有粉性。見圖1A2。
1年生栽培品葛根片，多呈圓橫切片，直徑2～3 cm,厚0.5～1 cm。外皮淺棕色，有縱皺紋。橫切面黃白色或淡棕色，可見淡棕色同心性環(huán)紋。體重，質(zhì)硬，有粉性。無臭，味微甜。見圖1B4。2年生栽培品葛根片，呈四分或多分橫切片，直徑2～3 cm,厚0.5～1 cm。與1年生不同還在于：藥材直徑較大，橫切面可見較多層淡棕色同心性環(huán)紋。見圖1B5。3年生栽培品葛根片，藥材性狀與2年生者大致相似。表1 葛根實驗樣品（略）
3.2 根橫切面
3.2.1 葛根野生品木栓細胞多層，細胞扁平，切向延長，長方形，排列整齊。維管束占大部分，呈異型構(gòu)造。韌皮部與木質(zhì)部相間排列，形成多個同心環(huán)。射線較窄，4～5細胞寬。韌皮部有眾多晶鞘纖維束，徑向排列；可見切向排列的分泌道群，細胞內(nèi)含棕色塊狀物。木質(zhì)部導管密集，粗大，直徑100～455 μm；導管間有晶鞘纖維束及較少分泌道群。纖維束中纖維極長，壁厚；周圍細胞含草酸鈣方晶，形成晶鞘纖維束。薄壁細胞中含少量淀粉粒，或極少見。見圖2D。
3.2.2 葛根栽培品葛根1年生栽培品與野生品不同處：韌皮部與木質(zhì)部相間排列同心環(huán)1～2個。木質(zhì)部導管排列稀疏，導管直徑較小，直徑56～178 μｍ，與纖維束均呈徑向相間排列。晶鞘纖維束較少。分泌道群少見。薄壁細胞含眾多淀粉粒，淀粉粒單粒球形、半圓形或多角形，直徑 3～37 μｍ，臍點點狀、裂縫狀或星狀；復(fù)粒由2～10 分粒組成。見圖2A。
葛根2年生栽培品：韌皮部與木質(zhì)部相間排列同心環(huán)3～4個。導管直徑67～222 μｍ，分泌道群呈徑向排列。見圖2B。
葛根3年生栽培品：與2年生栽培品相似，導管直徑111～333 μｍ。見圖2C。
3.3 解離組織和粉末特征
3.3.1 葛根野生品粉末棕色至淺棕色。淀粉粒較少，單粒球形、半圓形或多角形，直徑 5～25 μｍ，臍點點狀、裂縫狀或星狀；復(fù)粒由2～10 分粒組成。纖維多成束，直徑 7.5～25 μｍ，壁厚，木化，周圍細胞大多含草酸鈣方晶，形成晶纖維，含晶細胞壁木化增厚。草酸鈣方晶長徑13～25 μｍ，短徑10～23 μｍ。石細胞少見，類圓形或多角形，直徑38～70 μm 。具緣紋孔導管較大，多破碎，具緣紋孔六角形或橢圓形，排列極為緊密。見圖3A。
3.3.2 葛根栽培品粉末黃白色或淡棕色。淀粉粒眾多，單粒球形、半圓形或多角形，直徑 5～25 μｍ，臍點點狀、裂縫狀或星狀；復(fù)粒由2～10 分粒組成。纖維多成束，直徑 7.5～27.5 μｍ，壁厚，木化，周圍細胞大多含草酸鈣方晶，形成晶纖維，含晶細胞壁木化增厚。草酸鈣方晶長徑10～22 μｍ，短徑12.5～27.5 μｍ。具緣紋孔導管較大，多破碎，具緣紋孔六角形或橢圓形，排列極為緊密。見圖3B。
4 結(jié)論與討論
葛根野生品與栽培品藥材性狀存在區(qū)別。主要表現(xiàn)在藥材個子野生品呈長圓柱形，直徑(0.5)1～6 cm。橫切面色澤較深，呈棕褐色，纖維性，可見棕色同心性環(huán)紋。質(zhì)韌，纖維性強。葛根栽培品根明顯膨大，粉性增強。其藥材個子呈長紡錘形或長圓柱形，直徑2～12 cm。橫切面顏色較淺，呈黃白色，可見淡棕色同心性環(huán)紋。體重，有粉性。見表2。表2 葛根野生品與栽培品藥材性狀顯微組織比較（略）
葛根野生品與栽培品在顯微組織方面有區(qū)別，表現(xiàn)在根橫切面葛根野生品晶鞘纖維束眾多，有多層切向排列的細胞內(nèi)含棕色塊狀物的分泌道群，木質(zhì)部導管密集，粗大；栽培品晶鞘纖維束、分泌道群均較少，多徑向排列；木質(zhì)部導管排列稀疏，徑向排列，導管直徑隨生長年限增加增粗。葛根野生品粉末中淀粉粒較少，有的產(chǎn)地樣品極少見淀粉粒。栽培品粉末淀粉粒眾多。見表2。
葛根不同生長年限的導管直徑1年生的較小，直徑56～178 μｍ，隨生長年限的增加，導管直徑增粗，3年以上，導管直徑接近野生品。
【參考文獻】
［1］國家藥典委員會.中國藥典，Ⅰ部［S］.北京：化學工業(yè)出版社，2005：233.
［2］樓之岑，秦 波.常用中藥材品種整理和質(zhì)量研究（北方編，第1冊）［M］. 北京：北京醫(yī)科大學、中國協(xié)和醫(yī)科大學聯(lián)合出版社，1995：379.
［3］盧先明,曾俊超,劉代明,等.川產(chǎn)葛根的生藥研究［J］. 四川中醫(yī), 1994,12(12)：13.
［4］中國醫(yī)學科學院藥物研究所. 中藥志，第1冊 ［M］. 北京：人民衛(wèi)生出版社，1982：563.
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