- 相關(guān)推薦
溫通法對(duì)S-荷瘤小鼠的抑瘤作用的實(shí)驗(yàn)探試究
摘要:目的 研究溫通法對(duì)小鼠s 肉瘤的抑瘤作用,并初步探討其抑瘤機(jī)制,為其臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。方法 建立昆明種小鼠S 肉瘤模型50個(gè)。隨機(jī)分為中藥高劑量組、中藥中劑量組、中藥低劑量組、荷瘤對(duì)照組、CTX化療組,通過(guò)對(duì)比觀測(cè)溫通法對(duì)小鼠體重、瘤重、肝脾重量及小鼠一般狀況的影響。結(jié)果荷瘤對(duì)照組瘤重明顯大于各治療組,與中藥低劑量組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),與其余各組比較有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),中藥高劑量組、高劑量組胸腺指數(shù)明顯高于荷瘤對(duì)照組(P<0,05),中藥高劑量組、中藥高劑量組脾指數(shù)高于荷瘤對(duì)照組(P<0.05)。結(jié)論 中藥治療各組能明顯抑制小鼠sⅢ肉瘤的生長(zhǎng),提高荷瘤小鼠機(jī)體免疫力,并能改善小鼠的一般狀況。
關(guān)鍵詞:溫通法;s 肉瘤;抑瘤作用;免疫調(diào)節(jié);中醫(yī)腫瘤學(xué);中醫(yī)腫瘤實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)
中醫(yī)認(rèn)為腫瘤的形成與氣滯、痰凝、血瘀等諸多因素有關(guān),但寒邪外侵、陽(yáng)氣虧虛乃為其最為重要的根本原因!鹅`樞·百病始生》對(duì)腫瘤之成因及其病變過(guò)程的論述最為精當(dāng):“黃帝日:積之始生,至其已成,奈何?岐伯日:積之始生,得寒乃生,厥乃成積也!蹦壳,多數(shù)醫(yī)家從熱毒人手,每投以寒涼消解之品,然而近年眾多醫(yī)家臨床發(fā)現(xiàn)很多惡性腫瘤患者具有畏寒乏力,舌淡苔白,脈沉遲無(wú)力等陽(yáng)虛寒凝的臨床表現(xiàn),投以溫陽(yáng)散寒藥,每收到較好療效。鑒此,本次實(shí)驗(yàn)確立了以溫通法治療腫瘤的原則,選用溫陽(yáng)的典型代表中藥附子、干姜、桂枝,以其合劑的灌服小鼠,通過(guò)觀測(cè)對(duì)荷瘤小鼠的抑瘤作用,對(duì)免疫器官的影響及小鼠一般狀況進(jìn)行比較,探討溫通法對(duì)s 。肉瘤的抑制作用,以期為溫通法在惡性腫瘤領(lǐng)域的進(jìn)一步應(yīng)用提供新的依據(jù)。
1 材料
1.1 動(dòng)物
昆明種健康小白鼠5O只,雌雄各半,質(zhì)量18~22g,6~8周齡,由河南省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。把它們隨機(jī)分為5組,雌雄隨機(jī),荷瘤對(duì)照組、中藥低劑量組、中藥中劑量組、中藥高劑量組、CTX化療組,每組10只。
1.2 瘤株
腹水型SⅢ小鼠瘤株,由河南省(鄭州大學(xué))醫(yī)藥科學(xué)研究所提供。
1.3 藥物及制備
1.3.1 中藥飲片
由河南省中醫(yī)院中藥藥房提供,按附子:干姜:桂枝=2:2:1的比例配制。取中藥飲片置煎煮容器中,加入相當(dāng)于生藥量5倍的冷水浸泡30min,武火煮沸后文火煮30min,過(guò)濾;藥渣加冷水繼續(xù)煎煮,武火煮沸后文火煮20min,過(guò)濾;合并兩次濾液,60%水浴濃縮,分為低、中、高3個(gè)劑量,經(jīng)計(jì)算低劑量組相當(dāng)于生藥材1.30g/ml的藥液,中劑量組相當(dāng)于生藥材2.56g/ml的藥液,高劑量相當(dāng)于生藥材3.83g/ml的藥液,冷卻后裝入滅菌藥瓶,置4~C冰箱保存?zhèn)溆谩?br />
1.3.2 注射用環(huán)磷酰胺(CTX)
江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司生產(chǎn),規(guī)格:200mg/支。產(chǎn)品批號(hào):07042021。現(xiàn)配現(xiàn)用。
2 方法
2.1 $18o荷瘤小鼠模型制備
將接種Sl8o第8天的腹水瘤小鼠處死,無(wú)菌條件下抽取腹水,用生理鹽水配制成約1×10。個(gè)/ml的細(xì)胞懸液,無(wú)菌條件下把5組小白鼠于每只左側(cè)腋下皮下注射0.2ml瘤細(xì)胞懸液。
2.2 給藥方法
中藥組:接種昆明鼠24h后中藥組進(jìn)行灌胃,每天1次,0.4ml/只;荷瘤對(duì)照組:生理鹽水灌胃,每天1次,0.4ml/只;CTX化療組:接種72h后生理鹽水配制成2mg/ml藥液,腹腔注射30mg/kg,隔日給藥。以上各組均用藥至接種后第1 1天。
2.3 監(jiān)測(cè)指標(biāo)
觀察小鼠接種前后的活動(dòng)性、反應(yīng)靈敏度、聚堆及毛發(fā)情況。末次給藥24h后處死小鼠,小心剝離瘤塊,解剖小鼠,分別用電子天平稱取小鼠體重、瘤重、胸腺及肝、脾重量。
3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
采用SPSS13.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差( ±s)表示,組間比較用單因素方差分析,P<0.01為差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
4 結(jié)果
4.1 溫通法對(duì)S 荷瘤小鼠瘤重的影響
結(jié)果顯示:溫通法對(duì)s 肉瘤生長(zhǎng)有明顯的抑制作用,荷瘤對(duì)照組瘤重明顯大于各治療組,與中藥低劑量組有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),與其余各組有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),CTX組瘤重略輕于中藥高劑量組,但差別不顯著,無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
4.2 對(duì)免疫應(yīng)答的影響
胸腺是T淋巴細(xì)胞分化成熟的中樞免疫器官,脾臟是人體最大的外周免疫器官,也是T、B淋巴細(xì)胞定居和接受抗原刺激后產(chǎn)生免疫應(yīng)答的重要場(chǎng)所,它們與機(jī)體的細(xì)胞免疫和體液免疫密切相關(guān)。免疫器官重量是反映機(jī)體非特異性免疫功能的重要指標(biāo)H 。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:荷瘤對(duì)照組的胸腺指數(shù)明顯高于中藥高劑量組,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P <0.05);荷瘤對(duì)照組的脾指數(shù)明顯高于中藥中劑量組、中藥高劑量組,與中藥高劑量組比較,有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),與中藥中劑量組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
4.3 各組小鼠一般狀況比較
荷瘤對(duì)照組:動(dòng)物活動(dòng)少,反應(yīng)遲緩,喜聚堆,毛發(fā)疏松無(wú)光澤,飲食少。CTX化療組:動(dòng)物活動(dòng)少,反應(yīng)遲緩,被毛較疏松欠光澤,飲食量減少。中藥低劑量組:動(dòng)物活動(dòng)較少,反應(yīng)較遲緩,喜聚堆,被毛較疏松欠光澤,飲食量好于CTX及荷瘤對(duì)照組。中藥中劑量組:動(dòng)物活動(dòng)可,反應(yīng)欠靈敏,被毛柔順,飲食量好于CTX及荷瘤對(duì)照組。中藥高劑量組:動(dòng)物較活潑,反應(yīng)靈敏,被毛柔順有光澤,飲食好于其他各組。
5 討論
綜合古代、近代及現(xiàn)代醫(yī)家所述,惡性腫瘤的發(fā)生是由于人體正氣不足,陰陽(yáng)氣血失調(diào),臟腑經(jīng)絡(luò)的功能障礙,致使機(jī)體的抗病能力低下,邪氣乘虛而入,氣、血、痰、毒等病邪互結(jié)于體內(nèi),日久成積而發(fā)瘕瘕積聚!端貑(wèn)·四氣調(diào)神大論篇第二》載:“陽(yáng)強(qiáng)不能密,陰氣乃絕,陰平陽(yáng)秘,精神乃治,陰陽(yáng)離決,精氣乃絕。”此論認(rèn)為疾病的根本病理改變是陰陽(yáng)之氣的失調(diào)所致,積是機(jī)體陽(yáng)氣虧虛的結(jié)果。陽(yáng)氣是機(jī)體呈彌散狀態(tài)的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),是保證生理活動(dòng)的動(dòng)力之源,一旦不足,則不僅易致寒邪侵襲、留滯,而且易致因臟腑功能減弱,出現(xiàn)病理產(chǎn)物,從而引起腫瘤的發(fā)生。
通過(guò)本實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析,溫通法不但可以直接抑制腫瘤的生長(zhǎng),而且通過(guò)影響免疫器官,提高機(jī)體免疫力,從而達(dá)到抑瘤作用。CTX組與中藥組小鼠的抑瘤效果相當(dāng),但中藥組生存質(zhì)量明顯高于CTX組小鼠及荷瘤對(duì)照組小鼠,小鼠的精神狀態(tài)、活動(dòng)能力、毛發(fā)情況等均好于CTX組和荷瘤對(duì)照組,提示中藥組在提高小鼠機(jī)體免疫力方面是化療藥物不可比擬的,顯示了其獨(dú)特的優(yōu)勢(shì),從而為其在臨床上應(yīng)用提供了新的思路和理論依據(jù)。溫陽(yáng)法對(duì)小鼠免疫機(jī)能的影響和其抑瘤作用關(guān)系,尚需要進(jìn)一步的研究來(lái)驗(yàn)證,同時(shí),對(duì)于其抑瘤有效成分也有待于深入研究。
本文來(lái)自中國(guó)代寫(xiě)碩士論文網(wǎng),我們?yōu)槟峁└嗟拇T士畢業(yè)論文
參考文獻(xiàn)
[1] 邸若虹,李永健.應(yīng)用溫陽(yáng)法辨治腫瘤述要[J].中醫(yī)藥學(xué)刊,2001,19(5):471-472.
[2] 劉嘉湘,施志明,徐振嘩,等.滋陰生津益氣溫陽(yáng)法治療晚期原發(fā)性肺腺癌的臨床研究[J].中醫(yī)雜志,1995,36(3):155—158.
[3] 李永健,方肇勤.溫陽(yáng)在腫瘤治療中的應(yīng)用與思考[J].中醫(yī)藥學(xué)報(bào),2001,29(2):1—3.
[4] 常江,王陸一,烏蘭,等.紅棗注射液對(duì)小鼠免疫功能的影響[J].包頭醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2002,18(2):87.
【溫通法對(duì)S-荷瘤小鼠的抑瘤作用的實(shí)驗(yàn)探試究】相關(guān)文章:
環(huán)磷酰胺對(duì)小鼠S180肉瘤抑瘤作用的量效關(guān)系08-02
蒲公英多糖體外抑瘤和抗突變作用研究09-09
小鼠心肌組織裂解上清液誘導(dǎo)小鼠骨髓瘤Sp2/0細(xì)胞凋亡09-13
中學(xué)物理教學(xué)中實(shí)驗(yàn)法的作用探析08-13
談羥丁酸鈉對(duì)小鼠遺忘作用的影響07-28
人血管瘤裸小鼠移植模型形態(tài)學(xué)動(dòng)態(tài)觀察09-02