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利用毒效組分含量控制附子臨床湯劑工藝研究論文
1 儀器與材料
分光光度計(jì)：Perkin?Elmer Lambda 35型；電子分析天平：Sartorius系列十萬分之一（德國）；pHS?2型酸度計(jì)（上海雷磁儀器廠）。對(duì)照品：烏頭堿（110720?200208，中國藥品生物制品檢定所）；乙醇、溴甲酚綠、氯仿、乙醚、氨水皆為分析純。其他試劑自備。生附子由成都中醫(yī)藥大學(xué)中藥鑒定教研室嚴(yán)鑄云副教授鑒定為烏頭Aconitum carmichaeli Debx.的側(cè)生子根及加工品。黑順片，白附片為同批加工品，購于四川江油GAP生產(chǎn)基地，質(zhì)量均符合藥典規(guī)定。
2 方法與結(jié)果
2.1 藥材毒效因子的測(cè)定離子對(duì)溴甲酚綠法測(cè)定總生物堿是經(jīng)典的生物堿測(cè)定方法，本研究參考文獻(xiàn)［5］中的方法，酯型生物堿測(cè)定方法參考2005版《中國藥典》［4］制川烏項(xiàng)下測(cè)定法測(cè)定。水提液樣品的前處理略做修改，并進(jìn)行了方法學(xué)考察，結(jié)果符合穩(wěn)定性、精密度、加樣回收率均達(dá)到定量要求。依前法測(cè)定藥材TA和EA，并計(jì)算毒效因子，結(jié)果見圖1。結(jié)果表明，附子炮制后毒效成分比例變化有差異，黑順片中毒性成分占總生物堿比例增大，白附片中毒性成分占總生物堿比例減少。提示不同炮制方法改變了毒效組分比例。
2.2 水煎過程控制研究
2.2.1 供試液的制備分別取生附子、黑順片，白附片粗粉（1號(hào)篩）適量，精密稱定，置圓底燒瓶中，加10倍量水，浸泡30 min，回流，快速燒開后，保持微沸2 h；趁熱粗濾，用適量水洗滌殘?jiān)?次，合并洗液和濾液，3 000 r/min離心（5 min），過濾，70℃下減壓濃縮至1∶1體積；用氨水調(diào)pH=9～10，TA測(cè)定用乙醚一氯仿（3:1）的混合液、EA測(cè)定用乙醚萃取3次，置蒸發(fā)皿中水浴低溫?fù)]干溶劑，備用。
2.2.2 加水量的影響取3批藥材適量各7份，分別加6，8，10，12倍量水，依“2.2.1”項(xiàng)方法制備，備用。依前法測(cè)定TA和EA，并計(jì)算毒效因子，結(jié)果見圖2。結(jié)果表明，水煎過程顯著降低了各樣品的毒性，提高了其毒效因子水平；其中黑順片影響最大，白附片影響最小。不同加水量對(duì)炮制品毒效因子影響較小。提示水煎過程中毒效組分溶出水平有差異，加水量對(duì)其影響較小。
2.2.3 煎煮時(shí)間的影響取3批藥材適量各7份，分別加水煎煮2，4，6，8，12 h，依“2.2.1”項(xiàng)方法制備，備用。依前法測(cè)定TA和EA，并計(jì)算毒效因子，結(jié)果見圖3。結(jié)果表明，煎煮時(shí)間對(duì)生、炮制品的毒效因子影響截然不同；其中對(duì)生附子影響較小，對(duì)炮制品而言，6 h后黑順片和白附片毒效因子水平正好相反。提示控制煎煮時(shí)間可以改變不同炮制品的毒效因子水平。
2.2.4 煎煮次數(shù)的影響取3批藥材適量各7份，分別加水煎煮3次A（2?0.5?0.5），B（2?1?1），C（2?2?2）依“2.2.1”項(xiàng)方法制備，備用。依前法測(cè)定TA和EA，并計(jì)算毒效因子，結(jié)果見圖4。結(jié)果表明，煎煮次數(shù)顯著改變生、炮制品的毒效因子；其中生品影響最大。提示單煎有利于毒效組分的穩(wěn)定。
2.2.5 濃縮條件的影響取3批藥材適量各4份，濃縮分別采用60℃，70℃，80℃減壓濃縮，100℃蒸發(fā)至1∶1，備用。依前法測(cè)定TA和EA，并計(jì)算毒效因子，結(jié)果見圖5。結(jié)果表明，濃縮條件對(duì)生附子毒效因子影響很大，對(duì)炮制品影響較小。提示炮制品毒效組分比較穩(wěn)定，能耐熱。
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