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FQ-PCR法檢測外周血單個核細胞內(nèi)HCVRNA含量的相關實驗條件分析
畢業(yè)論文
| 全部作者： | 鐘華平 趙偉 沈玲 薛蓉 吳引偉 殷艷天 |
| 第1作者單位： | 東南大學 |
| 論文摘要： | 目的 對采用實時熒光定量PCR（FQ-PCR）法檢測外周血單個核細胞內(nèi)（PBMC）HCVRNA含量過程中洗滌細胞的方法及標本保存的條件進行探索。方法分別于同1天內(nèi)收集分離6例（A組）和11例（B組）血清HCVRNA陽性慢性丙型肝炎患者PBMC，A組分別采用常規(guī)法及改良法即在第2 次離心前加入10g/LRNA酶50μl處理15分鐘洗滌細胞5次，并留取每次洗滌液及細胞；B組采用改良法洗滌細胞3次后并把細胞分成2份，分別作為新鮮組和-20℃凍存組，然后采用離心柱型RNA提取法和FQ-PCR檢測洗滌液和細胞中HCVRNA含量。結果①洗滌完3次時，常規(guī)法有1份洗滌液HCV為陽性，改良法均為陰性；與第1次洗滌液相比，改良法再洗滌1次的病毒含量下降幅度明顯高于常規(guī)法；②新鮮組與凍存組HCVRNA含量不存在明顯差異，Spearman\\\'S相關系數(shù)為0.93，P＜0.01結論 洗滌PBMC以采用改良法洗滌3次為宜；-20℃簡易凍存6周的PBMC標本仍可用于FQ-PCR檢測。 |
| 關鍵詞： | 實時熒光定量PCR; 外周血單個核細胞; 丙型肝炎病毒; 遠程下載 論文(免費PDF論文全文) |
| 發(fā)表日期： | 2007年09月25日 |
| 同行評議： | 1.原文“affiliated with”應“affiliated to”。見牛津現(xiàn)代高級英漢辭典。2.原文“To explore that a method of ......”可為“To examine a methodof ......”。此實驗方法在國內(nèi)外已開展多年。3.原文“然而本實驗并未出現(xiàn)這種現(xiàn)象，可能與離心參數(shù)不同、細胞內(nèi)病毒含量低和樣本量小等有關(見討論第1節(jié))”。建議：(1)在科技論文中盡可能不用“可能”2字；(2)本研究的樣本量確實是小，能否增加1定的樣本數(shù)量。 |
| 綜合評價： | |
| 修改稿： | |
| 注：同行評議是由特聘的同行專家給出的評審意見，綜合評價是綜合專家對論文各要素的評議得出的數(shù)值，以1至5顆星顯示。 | |
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