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化學(xué)合成siRNA阻斷小鼠骨髓源性不成熟樹突狀細(xì)胞GAPDH的表達(dá)

時(shí)間:2024-07-28 14:17:28 臨床醫(yī)學(xué)畢業(yè)論文 我要投稿
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化學(xué)合成siRNA阻斷小鼠骨髓源性不成熟樹突狀細(xì)胞GAPDH的表達(dá)

畢業(yè)論文

全部作者: 蔡端 顧曉冬 項(xiàng)建斌 陳宗佑
第1作者單位: 復(fù)旦大學(xué)附屬華山醫(yī)院
論文摘要: 目的 觀察化學(xué)合成siRNA在轉(zhuǎn)錄后水平即mRNA水平降低小鼠不成熟樹突狀細(xì)胞基因表達(dá)的效率,并對(duì)其影響因素進(jìn)行初步探討。方法 體外取小鼠脛骨和股骨的骨髓,分離、培養(yǎng)不成熟樹突狀細(xì)胞,應(yīng)用化學(xué)合成的不同濃度siRNA在LipofectAMINE 2000轉(zhuǎn)染試劑介導(dǎo)下轉(zhuǎn)染樹突狀細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測siRNA的轉(zhuǎn)染效率,RT-PCR檢測小鼠不成熟樹突狀細(xì)胞中GAPDH mRNA水平的變化,臺(tái)盼藍(lán)染色測定各組中培養(yǎng)細(xì)胞的存活率。結(jié)果 脂質(zhì)體能夠?qū)⒒瘜W(xué)合成siRNA轉(zhuǎn)入樹突狀細(xì)胞中,轉(zhuǎn)染終濃度為100~600nmol/L的siRNA能特異有效地阻斷GAPDH的表達(dá),而轉(zhuǎn)染終濃度為50~400nmol/L的siRNA有利于細(xì)胞存活。結(jié)論 siRNA能在不成熟樹突狀細(xì)胞內(nèi)啟動(dòng)RNA干擾作用,適宜濃度的siRNA能在特異有效地阻斷內(nèi)源性基因表達(dá)的同時(shí),最大限度地保持細(xì)胞活力。
關(guān)鍵詞: siRNA;樹突狀細(xì)胞;GAPDH;RNA干擾 遠(yuǎn)程下載 論文(免費(fèi)PDF論文全文)
發(fā)表日期: 2006年10月17日
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化學(xué)合成siRNA阻斷小鼠骨髓源性不成熟樹突狀細(xì)胞GAPDH的表達(dá)

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