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化學(xué)合成siRNA阻斷小鼠骨髓源性不成熟樹突狀細(xì)胞GAPDH的表達(dá)
畢業(yè)論文
| 全部作者： | 蔡端 顧曉冬 項(xiàng)建斌 陳宗佑 |
| 第1作者單位： | 復(fù)旦大學(xué)附屬華山醫(yī)院 |
| 論文摘要： | 目的 觀察化學(xué)合成siRNA在轉(zhuǎn)錄后水平即mRNA水平降低小鼠不成熟樹突狀細(xì)胞基因表達(dá)的效率，并對(duì)其影響因素進(jìn)行初步探討。方法 體外取小鼠脛骨和股骨的骨髓，分離、培養(yǎng)不成熟樹突狀細(xì)胞，應(yīng)用化學(xué)合成的不同濃度siRNA在LipofectAMINE 2000轉(zhuǎn)染試劑介導(dǎo)下轉(zhuǎn)染樹突狀細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測siRNA的轉(zhuǎn)染效率，RT-PCR檢測小鼠不成熟樹突狀細(xì)胞中GAPDH mRNA水平的變化，臺(tái)盼藍(lán)染色測定各組中培養(yǎng)細(xì)胞的存活率。結(jié)果 脂質(zhì)體能夠?qū)⒒瘜W(xué)合成siRNA轉(zhuǎn)入樹突狀細(xì)胞中，轉(zhuǎn)染終濃度為100～600nmol/L的siRNA能特異有效地阻斷GAPDH的表達(dá)，而轉(zhuǎn)染終濃度為50～400nmol/L的siRNA有利于細(xì)胞存活。結(jié)論 siRNA能在不成熟樹突狀細(xì)胞內(nèi)啟動(dòng)RNA干擾作用，適宜濃度的siRNA能在特異有效地阻斷內(nèi)源性基因表達(dá)的同時(shí)，最大限度地保持細(xì)胞活力。 |
| 關(guān)鍵詞： | siRNA；樹突狀細(xì)胞；GAPDH；RNA干擾 遠(yuǎn)程下載 論文(免費(fèi)PDF論文全文) |
| 發(fā)表日期： | 2006年10月17日 |
| 同行評(píng)議： | （暫時(shí)沒有）
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| 綜合評(píng)價(jià)： | （暫時(shí)沒有） |
| 修改稿： |
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