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人UroplakinII與小鼠UroplakinII啟動(dòng)子活性和組織特異

時(shí)間:2023-03-08 06:04:27 臨床醫(yī)學(xué)畢業(yè)論文 我要投稿
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人UroplakinII與小鼠UroplakinII啟動(dòng)子活性和組織特異性對(duì)比

畢業(yè)論文

全部作者: 朱宏建 曾祥福 魏守順 郭應(yīng)祿
第1作者單位: 武警總醫(yī)院泌尿外科
論文摘要: 膀胱癌是泌尿外科最常見(jiàn)的惡性腫瘤,基因治療已成為治療惡性腫瘤的重要方法之1。本研究旨在探討人UroplakinII (UPII) 啟動(dòng)子與小鼠UPII啟動(dòng)子在人細(xì)胞株中的啟動(dòng)活性和組織特異性強(qiáng)弱。方法: 構(gòu)建以人或小鼠UPII啟動(dòng)子為調(diào)控基因,以綠色熒光蛋白(GFP)和熒光素激酶(Luc)為報(bào)告基因的重組質(zhì)粒,應(yīng)用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染技術(shù),將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染入膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞(BIU-87)和腎癌細(xì)胞(GRC-1)、臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞(EC)、肺癌細(xì)胞(A549)、皮膚成纖維細(xì)胞(Hs27),利用共聚焦顯微鏡、流式細(xì)胞儀和微板檢測(cè)儀觀(guān)察細(xì)胞表達(dá)GFP和Luc的情況。結(jié)果: 含人UPII啟動(dòng)子重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染后,BIU-87表達(dá)GFP較多,10-15/HP,亮度較強(qiáng),流式細(xì)胞儀測(cè)定表達(dá)量為10.1%。而GRC-1、EC細(xì)胞表達(dá)極少,0-5/HP,亮度暗,流式細(xì)胞儀測(cè)定表達(dá)量為0和1.8%。Luc在BIU-87中的表達(dá)量是其它組織細(xì)胞的2.2倍以上。含小鼠UPII啟動(dòng)子重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染后,BIU-87表達(dá)GFP較多,5~10/HP,亮度較強(qiáng),流式細(xì)胞儀測(cè)定表達(dá)量為4.34%。而EC細(xì)胞表達(dá)極少,0~2/HP,亮度暗,流式細(xì)胞儀測(cè)定表達(dá)量分別為0%。Luc在BIU-87中的表達(dá)量是其他組織細(xì)胞的1.8~8.2倍,人UPII啟動(dòng)子與小鼠UPII啟動(dòng)子相比,無(wú)論是GFP還是Luc差異有顯著性(P<0.01)。結(jié)論: 人UPII 啟動(dòng)子比小鼠UPII啟動(dòng)子在人細(xì)胞株中具有更高的啟動(dòng)活性和更低的組織特異性。為靶向性基因治療膀胱癌提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
關(guān)鍵詞: UroplakinII;啟動(dòng)子;膀胱癌 遠(yuǎn)程下載 論文(免費(fèi)PDF論文全文)
發(fā)表日期: 2006年11月30日
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【人UroplakinII與小鼠UroplakinII啟動(dòng)子活性和組織特異】相關(guān)文章:

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